¿Cómo es la técnica de la Tinción de Ziehl Neelsen?


La tinción de ziehl neelsen es una tinción muy usada en la práctica clínica y se usa para la identificación de las bacterias ácido alcohólico (Ver estructura de bacterias) resistente como lo son el Micoplasma, las micobacterias entre otros.

Esta técnica fue descrita por primera vez por el bacteriólogo Franz Ziehl y el Patólogo Friedrich Neelsen

Lo que se logró con esta tinción fue diferenciar las bacterias ácido alcohol resistente quienes tienen una diferencia diferente a las gram positivas y gram negativas como se describe en este artículo .

PASOS PARA LA TINCIÓN DE ZIEHL NEELSEN

Vamos a a explicar paso a paso la tecnica de esta tinicón al igual que lo hicimos con la tinción de GRAM

Paso 1 Tinción de Ziehl Neelsen (Recoger la muestra a estudio)

Recoger la muestra a estudiar


Paso 2 Tinción de Ziehl Neelsen (Extender la muestra con el asa)

Extender la muestra estudiada sobre el portaobjetos


Paso 3 Tinción de Ziehl Neelsen (fijar la muestra)

Fijar la muestra

La muestra se puede fijar ya sea con metanol o pasandolo por el mechero evitando que se queme.


Paso 4 y 5 Tinción de Ziehl Neelsen (Aplicar fucsina fenicada y calentar por 5 minutos)

Aplicar Fucsina fenicada y calentar durante 5 minutos

Este punto es fundamental ya que permite la unión del colorante con el acido micolico de las pared de estas bacterias.


Paso 6 Tinción de Ziehl Neelsen (lavar con agua)

Lavar con agua


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Paso 7 Tinción de Ziehl Neelsen (Aplicar Alcohol ácido)

Aplicar Alcohol ácido como solución decolorante

En este paso se busca que las bacterias que no tienen acido micolico no queden teñidas


Paso 8 Tinción de Ziehl Neelsen (Lavar con agua)

Lavar con Agua


Paso 9 Aplicar Azul de Metinleno de Löeffler

Cubrir con Azul de Metileno de Löeffler durante 1 minuto

Una vez realizados estos pasos se debe dejar secar el porta objetos y pasar al microscopio para observar cuales son las bacterias que tenemos.


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